感受態(tài)，是指宿主細(xì)胞最容易接受外源基因并實(shí)現(xiàn)將其轉(zhuǎn)化的一種生理狀態(tài)，它是由受體菌的遺傳性狀所決定的，同時(shí)也受菌齡以及外界環(huán)境因子的影響， 比如Ca²⁺就可以大大促進(jìn)轉(zhuǎn)化的作用。細(xì)胞的感受態(tài)一般出現(xiàn)在對(duì)數(shù)生長期，新鮮幼嫩的細(xì)胞是制備感受態(tài)細(xì)胞和進(jìn)行成功轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵。

LB培養(yǎng)基（固體、液體）：Tryptone 1.00g，Yeast 0.50g，NaCl 1.00g，定容至100ml。（固體培養(yǎng)基加入1.5%的瓊脂）

抗性：卡那霉素，氨卞青霉素，氯霉素，四環(huán)素。

• 取－80℃凍存的感受態(tài)菌株，用接種環(huán)劃線分離接種于固體平板上（平板抗性根據(jù)感受態(tài)選擇），做好標(biāo)記，倒置于37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
• 第二天，從平板上挑取單個(gè)菌落，接種至含有4ml LB培養(yǎng)液（抗性根據(jù)感受態(tài)選擇）的試管中，37℃,195rpm，震蕩培養(yǎng)過夜。次日取菌液4ml接種至含有400ml LB培養(yǎng)基（抗性根據(jù)感受態(tài)選擇）的2L搖瓶中，37℃，200rpm震蕩培養(yǎng)約2-3小時(shí)。
• 當(dāng)菌落OD600nm值達(dá)到0.3－0.5時(shí)，將搖瓶取出放置于冰上10-15min。在無菌條件下把菌液倒入500ml的預(yù)冷的離心管中，離心4℃,3000r，8min。
• 棄去上清，加入約200ml的預(yù)冷的CaCl2溶液，吹打混勻，懸浮菌體，放入冰浴30min。
• 離心4℃,3000r，8min，棄去上清，加入約8ml預(yù)冷的CaCl2溶液，重新懸浮菌體。
• 將用CaCl2溶液處理后的菌體分裝于1.5ml的EP管中，每管110ul，保存于-80℃的超低溫冰箱中。